Développement préclinique d'un récepteur d'antigène chimérique bispécifique ciblant à la fois le CD19 et le CD22

Résumé La leucémie aiguë lymphoblastique (LAL) est la malignité pédiatrique la plus fréquente. Malgré les avancées dans le traitement initial, la LAL en rechute et réfractaire demeure une cause principale de mortalité liée au cancer chez les enfants. L'immunothérapie utilisant des cellules T génétiquement modifiées exprimant des récepteurs d'antigène chimériques (CAR) ciblant le CD19 a démontré des résultats cliniques spectaculaires chez les enfants et les jeunes adultes atteints de LAL pré-B, avec un taux de rémission complète de 70 à 90 % dans plusieurs essais cliniques. Cependant, tous les patients ne répondent pas et au moins 10 % des patients rechutent en raison de la perte de l'épitope ciblé CD19. Le CD22 est un autre antigène de surface pan-B qui est largement exprimé sur les blasts de LAL et a été ciblé avec succès en utilisant des immunoconjugués. Nous avons récemment développé un CAR CD22 hautement actif actuellement testé dans un essai clinique. Conceptuellement, le ciblage double à la fois du CD19 et du CD22 dans la LAL pré-B avec un seul CAR bispécifique peut entraîner une avidité accrue et une activation des cellules T augmentée, ce qui peut conduire à des réponses additives ou synergistiques par rapport au ciblage d'un seul antigène. De plus, étant donné qu'il existe des niveaux d'expression hétérogènes de CD19 et de CD22 sur les blasts leucémiques, le ciblage double peut également fournir une thérapie plus largement efficace. Enfin, le ciblage simultané des deux CD19 et CD22 à la surface de la LAL pré-B peut réduire la probabilité d'échappement de l'antigène en raison de la régulation à la baisse ou de la délétion. Nous décrivons le développement préclinique de deux nouveaux CAR bispécifiques CD19 et CD22 assemblés avec des domaines de liaison de fragments variables à chaîne unique (scFv) CD19 et CD22 sur un seul construct. Les cellules T transduites avec les CARs bispécifiques CD19/CD22 présentent une expression de surface de CAR comparable à celle des cellules T exprimant soit le CAR CD19 soit le CAR CD22. Les cellules T exprimant le CAR bispécifique sont actives in vitro contre des lignées cellulaires de LAL exprimant à la fois le CD19 et le CD22, mesurées par la production d'interféron gamma et la libération de chrome. L'activité in vitro est maintenue contre les cellules K562 exprimant soit le CD19 soit le CD22. Fait intéressant, l'ordre et le linker entre les scFvs CD19 et CD22 dans le construct CAR ont un impact majeur sur l'efficacité du CAR double, un scFv de liaison CD22 distal de membrane montrant une efficacité améliorée. Enfin, dans des modèles de xénogreffe, les deux CARs bispécifiques éradiquent efficacement les lignées cellulaires de LAL et les xénogreffes dérivées de patients. Le traitement in vivo d'une lignée leucémique Crisper-knockdown-négative pour le CD19 et d'une xénogreffe dérivée de patient négative pour le CD19 est en cours. En résumé, les CARs bispécifiques CD19/CD22 démontrent une activité préclinique robuste contre la LAL pré-B et offrent une stratégie pour améliorer l'efficacité clinique de la thérapie CAR. Révélations Aucun conflit d'intérêts pertinent à déclarer.