L'ARN 5′-triphosphate nécessite des structures appariées pour activer le signalement antiviral via RIG-I

Le gène inductible par l'acide rétinoïque (RIG)-I de l'ATPase détecte l'ARN viral dans le cytoplasme des cellules infectées et active ensuite les mécanismes de défense antivirale cellulaires. RIG-I reconnaît des structures moléculaires qui discriminent l'ARN viral de l'ARN de l'hôte. Ici, nous montrons que les ligands de RIG-I nécessitent des structures appariées en conjonction avec un 5'-triphosphate libre pour déclencher un signalement antiviral. Les ligands d'ARN 5'-triphosphate chimiquement synthétisés, jusqu'alors indisponibles, ne déclenchent pas la production d'IFN dépendante de RIG-I dans les cellules, et ils ne parviennent pas à déclencher l'activité ATPase de RIG-I sans une séquence appariée. De manière cohérente, l'ARN immunostimulant provenant de cellules infectées par un virus reconnu par RIG-I est sensible aux RNases spécifiques à double brin, mais pas à simple brin. In vitro, les séquences appariées et le 5'-triphosphate se lient à des sites distincts de RIG-I et synergisent pour déclencher l'induction de multimères RIG-I compétents en signalement. Renforçant notre modèle d'un motif moléculaire bipartite pour l'activation de RIG-I, nous montrons que l'activité des ARN 5'-triphosphate censés être « à brin unique », générés par transcription in vitro, dépend des sous-produits étendus et appariés inopinément, mais couramment, produits par cette méthode. Ensemble, nos résultats définissent avec précision un motif moléculaire minimal suffisant pour activer RIG-I, qui peut être trouvé dans les génomes ou les transcrits viraux.