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La détermination et l'identification sans ambiguïté des stéréoisomères de caroténoïdes à partir de tissus biologiques, évitant l'isomérisation et l'oxydation dues au processus d'extraction, restent un défi majeur. En particulier, l'analyse des stéréoisomères de la lutéine et de la zéaxanthine revêt une grande importance, car ils sont les principaux constituants de la macula lutea, la partie centrale de la rétine humaine, et agissent comme de possibles agents dans la prévention et le traitement de la dégénérescence maculaire liée à l'âge (AMD). En combinant une technique d'extraction douce et rapide telle que la dispersion sur phase solide matricielle avec la chromatographie liquide à haute performance (HPLC), les stéréoisomères de lutéine et de zéaxanthine, extrêmement légers et sensibles à l'oxygène, sont extraits, enrichis et séparés directement des échantillons solides de plantes ou de tissus, excluant la préparation d'artéfacts. Les séparations HPLC sont réalisées avec des phases C30 en raison de leur sélectivité de forme améliorée par rapport aux phases C18 et couplées en ligne à la spectrométrie de masse (MS) et à la spectroscopie par résonance magnétique nucléaire (NMR). En utilisant HPLC-MS avec ionisation chimique à pression atmosphérique, les stéréoisomères de lutéine peuvent être distingués des stéréoisomères de zéaxanthine lors d'une seule course chromatographique dans la plage supérieure du picogramme, tandis que le couplage HPLC-NMR permet l'identification sans équivoque de chaque stéréoisomère avec une concentration dans la plage supérieure du nanogramme. Cet article propose une méthode analytique pour la détermination sans artéfacts des stéréoisomères de lutéine et de zéaxanthine directement à partir des tissus biologiques solides d'épinards en tant que source de caroténoïdes et de rétine en tant que sphère d'activité pour l'AMD. De plus, les structures de ces stéréoisomères ont été élucidées sans ambiguïté en employant des techniques analytiques hyphénées.
Dachtler et al. (ven,) ont étudié cette question.