Duplication du gène FcγRIIIB : Preuves de la présence et de l'expression de trois gènes FcγRIIIB distincts chez des individus NA(1+,2+)SH(+).

Récemment, un nouvel alloantigène sur le récepteur Fc de type IIIb (Fc gamma RIIIb), SH, a été décrit (Bux et al, Blood 89:1027, 1997). Nous avons identifié trois individus en bonne santé dont les neutrophiles réagissaient positivement avec le sérum antisérique SH. Le phénotype antigénique des neutrophiles (NA) des trois donneurs était NA(1+,2+). L'analyse de l'ADN génomique a montré que les trois donneurs étaient positifs pour la mutation SH-encoding décrite dans le gène NA2-Fc gamma RIIIB, 266C-->A. Cependant, le génotypage NA(1,2) et le séquençage de nucléotides d'un fragment spécifique NA2 amplifié à partir du fragment d'ADN génomique ont montré que ces individus portaient trois gènes Fc gamma RIIIB, à savoir NA1-Fc gamma RIIIB, NA2-Fc gamma RIIIB et SH-Fc gamma RIIIB, codant respectivement pour NA1-Fc gamma RIIIb, NA2-Fc gamma RIIIb et SH-Fc gamma RIIIb. L'analyse par Southern blot a confirmé ces résultats. De plus, les trois transcrits ont été isolés à partir de l'ARNm des neutrophiles. Pour déterminer si la présence de trois gènes Fc gamma RIIIB se traduisait par une expression membranaire plus élevée de Fc gamma RIIIb, nous avons mesuré la réactivité des neutrophiles d'individus NA(1+,2+)SH(+) avec un panel d'anticorps monoclonaux CD16 (MoAbs) par rapport à des neutrophiles de témoins NA(1+,2+)SH(-). La réactivité de quatre différents anti-pan-Fc gamma RIII MoAbs et de l'anticorps monoclonal spécifique NA2 GRM1 était plus élevée avec les neutrophiles SH(+) par rapport aux témoins, tandis que celle des MoAbs spécifiques NA1 était similaire, ce qui est en accord avec les résultats de l'analyse génomique. Nous avons observé que la réactivité avec l'anticorps monoclonal CD16 spécifique NA2 PEN1 était six fois plus élevée chez les individus SH(+) par rapport aux témoins. Apparemment, la substitution 60Ala-->Asp dans SH-Fc gamma RIIIb influence l'épitope reconnu par PEN1. En conclusion, nous avons identifié trois individus NA(1+,2+)SH(+) portant trois gènes Fc gamma RIIIB et observé un effet clair de dosage génique sur le niveau d'expression de Fc gamma RIIIb des neutrophiles.