La purification et les propriétés de la glycogène synthase du muscle squelettique du lapin

La glycogène synthase a a été purifiée plus de 500 fois par une procédure qui impliquait la solubilisation de l'enzyme à partir d'un complexe protéine-glycogène par l'action de la phosphorylase endogène et de l'enzyme de débranchement, suivie d'une chromatographie sur DEAE-cellulose, et soit d'une filtration sur gel avec Sepharose 4B, soit d'une fractionnement avec du polyéthylène glycol. 15 mg de protéines pouvaient être obtenues à partir de 1000 g de muscle en cinq jours, correspondant à un rendement de 20 %. La pureté était supérieure à 90 % selon l'électrophorèse sur gel et l'analyse ultracentrifugale. La composition en acides aminés a été déterminée et le coefficient d'absorption, A1%280 NM, mesuré par réfractométrie était de 13,4. La glycogène synthase a s'est sédimentée sous forme de deux composants majeurs, dont les deux étaient enzymatiquement actifs. La plus petite espèce (13,3 S) représentait 85 % et la plus grande espèce (19,0 S) 15 % du matériel. Le poids moléculaire du composant de 13,3 S a été déterminé à 377 000 par centrifugation à équilibre sédimentaire à grande vitesse. Le poids moléculaire de la sous-unité mesuré par électrophorèse sur gel en présence de sodium dodécylsulfate était de 88 000, indiquant que l'espèce 13,3-S est un tétramère. Les propriétés de l'enzyme sont comparées à celles obtenues par d'autres chercheurs.