Induction différentielle des régulateurs ADAM17 iRhom1 et 2 dans les cellules endothéliales

Contexte : La fonction endothéliale dépend de manière significative de la libération protéolytique de molécules de signal exprimées à la surface, de leurs récepteurs et des molécules d'adhésion via la métalloprotéinase ADAM17. Les pseudoprotéases iRhom1 et 2 fonctionnent indépendamment comme protéines adaptatrices pour ADAM17 et sont essentielles pour la maturation, le trafic et la régulation de l'activité d'ADAM17. Les données bioinformatiques ont confirmé que les cellules immunitaires expriment principalement iRhom2 tandis que les cellules endothéliales expriment préférentiellement iRhom1. Objectif : Ici, nous étudions les raisons possibles d'une expression plus élevée d'iRhom1 et la régulation inflammatoire potentielle d'iRhom2 dans les cellules endothéliales, et nous analysons les conséquences pour la maturation et la fonction d'ADAM17. Méthodes : Des cellules endothéliales primaires ont été cultivées en présence et en absence de flux avec et sans cytokines inflammatoires (TNFα et INFγ). La régulation des iRhoms a été étudiée par qPCR, les voies de signalisation impliquées ont été étudiées avec des inhibiteurs transcriptionnels et les conséquences ont été analysées par l'évaluation de la maturation d'ADAM17, de l'expression de surface et de la clivage du substrat d'ADAM17, la molécule d'adhésion jonctionnelle JAM-A. Résultats : L'iRhom1 endothélial est profondément régulé à la hausse par des contraintes de cisaillement physiologiques. Cela s'accompagne d'un phénotype homéostatique induit par le facteur de transcription KLF2 qui est cependant seulement partiellement responsable de la régulation d'iRhom1. En revanche, iRhom2 est régulé à la hausse de manière particulièrement marquée par les cytokines inflammatoires. Cela corrèle avec un phénotype inflammatoire induit par les facteurs de transcription NFκB et AP-1, parmi lesquels AP-1 est le plus pertinent pour la régulation d'iRhom2. Enfin, l'exposition aux contraintes de cisaillement et la stimulation inflammatoire ont des effets indépendants et aucun effet synergique sur la maturation, l'expression de surface et le relargage d'ADAM17 et de JAM-A. Conclusion : Les conditions de contraintes de cisaillement et d'inflammation régulent différemment iRhom1 et 2 dans les cellules endothéliales primaires, ce qui entraîne une régulation indépendante d'ADAM17.