Analyse par traceur isotopique stable par GC-MS, y compris la quantification des effets des isotopomères

Dans les études de traceurs métaboliques, il est souvent utile d'infuser des traceurs qui sont des variantes étiquetées différemment de la même molécule. Ces traceurs sont connus sous le nom d'isotopomères. L'analyse de l'enrichissement de chaque analogue isotopique peut être réalisée par chromatographie en phase gazeuse-spectrométrie de masse (GC-MS). Cependant, les données brutes de GC-MS doivent être corrigées pour fournir les informations requises. Cet article aborde comment transformer les données brutes de GC-MS, qui consistent en des rapports d'abondance relative à des masses d'ions spécifiques, en rapports molaires relatifs de molécules de traceurs et de traceés. Plusieurs facteurs de correction sont nécessaires. Tout d'abord, le bruit de fond doit être mesuré et corrigé, puisqu'il est toujours présent dans l'échantillon. Deuxièmement, les abondances dans le spectre de la molécule étiquetée sont différentes de celles dans la molécule non étiquetée, et cette "distorsion" de proportionalité est corrigée. Un troisième facteur de correction tient compte des spectres qui se chevauchent de deux ou plusieurs isotopomères qui ne peuvent pas être mesurés indépendamment. La correction finale élimine l'effet de "vision double" qui peut apparaître dans certains spectres en raison de la présence de espèces (M - H)+.