Purification de l'antigène tumoral de taille moyenne du polyomavirus par chromatographie d'immunoaffinité.

Nous avons utilisé des anticorps contre le peptide synthétique Lys-Arg-Ser-Arg-His-Phe, correspondant aux six acides aminés COOH-terminale de l'antigène tumoral moyen (T) du virus polyoma, pour purifier l'antigène T moyen par chromatographie d'affinité. La libération de l'antigène T moyen de l'anticorps anti-peptide a été réalisée dans des conditions douces en utilisant un excès important de peptide dans un tampon isotoniques à pH neutre contenant des détergents mixtes. Cette procédure a permis d'obtenir une purification de 2 500 fois de l'antigène T moyen en une seule étape. L'activité kinase protéique associée à l'antigène T moyen a également été libérée et a été étudiée dans cet état actif en solution. L'analyse par sédimentation a montré que la majeure partie de l'antigène T moyen purifié était sous forme monomérique (Mr environ 42 000) et n'était pas associée à une activité kinase protéique. Une petite fraction de l'antigène T moyen a été trouvée sous une forme sédimentant rapidement (Mr environ 200 000) qui possédait une activité kinase protéique.