Un modèle in vitro d'opacité de la capsule postérieure : SPARC et TGF-β2 minimisent la transition épithéliale-mésenchymateuse dans l'épithélium du cristallin

OBJECTIF : Ce rapport présente un modèle novel pour des études sur la matrice extracellulaire (MEC) dans l'opacification de la capsule postérieure (OCP) in vitro. Les cellules épithéliales du cristallin (CEC) ont été cultivées avec une lentille intraoculaire (LIO) sur une surface de collagène de type IV afin d'évaluer l'importance de l'interaction MEC-cellule dans la formation de l'OCP. Une migration, une prolifération et une expression anormales de protéines associées à la transition épithéliale-mésenchymateuse (TEM) qui caractérise l'OCP ont été observées en présence et en l'absence de la protéine matricielle SPARC (protéine sécrétée, acide et riche en cystéine), qui régule les interactions matrice-cellule. MÉTHODES : Le modèle d'OCP in vitro consistait en une LIO placée sur une membrane recouverte de collagène IV, un constituant majeur de la capsule du cristallin. Les CEC provenant des cristallins de souris de type sauvage (TS) et de souris nulles pour SPARC (SP-null) ont été cultivées en présence ou en l'absence de 10 ng/mL de TGF-beta2 et 20 μg/mL de SPARC humain recombiné (rhSP) pendant jusqu'à 6 jours. La migration des CEC a été quantifiée. Le marquage avec BrdU et la mesure de la synthèse d'ADN ont été des essais pour la prolifération cellulaire. L'expression des marqueurs de la TEM, du collagène de type I, de la fibronectine et de l'actine alpha de muscle lisse ont été évaluées à l'aide d'immunocytochimie ou d'immunoblots Western. RÉSULTATS : La migration, la prolifération et la synthèse des marqueurs de TEM des CEC étaient améliorées dans les CEC SP-null par rapport aux CEC TS. Le TGF-beta2 inhibait la migration et la prolifération des CEC TS et SP-null en présence de rhSP. Le TGF-beta2 augmentait la production de collagène de type I, de fibronectine et d'alpha-SMA. Les réponses des CEC SP-null étaient restaurées par l'ajout de rhSP. CONCLUSIONS : Un simple système de culture de LIO était utile pour l'évaluation des effets de SPARC et de TGF-beta2 sur l'OCP in vitro. L'action de TGF-beta2 sur la migration et la prolifération des CEC est influencée par SPARC, un régulateur des interactions matrice-cellule. Les résultats indiquent une intersection fonctionnelle entre les voies activées par TGF-beta2 et SPARC dans la formation de l'OCP.