Expression et localisation sous-cellulaire des molécules de la famille ABH chez l'homme

AlkB est une protéine d'Escherichia coli qui catalyse la déméthylation oxydative de l'1-méthyladénine et de la 3-méthylcytosine dans l'ADN et l'ARN. L'activité enzymatique d'AlkB dépend d'un domaine d'oxygénase (2OG-FeII) dépendant de 2-oxoglutarate et de Fe(II). Les homologues humains d'AlkB (hABH), hABH1, hABH2 et hABH3, qui possèdent également le domaine d'oxygénase 2OG-Fe(II), ont été précédemment identifiés. Une récente analyse bioinformatique suggère l'existence de cinq gènes ABH supplémentaires chez l'humain. Dans cette étude, nous avons identifié les ARNm hABH4-hABH7 et déterminé leur expression dans les tissus humains. De plus, une variante d'épissage de l'hABH2, dépourvue du domaine d'oxygénase 2OG-Fe(II), et un nouveau gène, hABH8, ont été clonés à partir de cDNA de testicule. hABH8 possède non seulement le domaine d'oxygénase 2OG-Fe(II) mais également un motif de liaison à l'ARN et un domaine de méthyltransférase. L'ARNm des huit molécules hABH a été détecté dans les 16 tissus humains normaux examinés. La localisation sous-cellulaire de EmGFP-hABH8 était limitée au cytoplasme. EmGFP-hABH1, 3, 4, 6 et 7 étaient localisés à la fois dans le cytoplasme et les noyaux. Fait intéressant, la variante d'épissage EmGFP-hABH2 se localisait dans le nucléoplasme avec un motif en points. Dans certaines cellules HeLa transfectées avec EmGFP-hABH5, une fluorescence en points a également été détectée dans le cytoplasme. Ces observations fournissent des informations importantes pour la future annotation de la famille de molécules hABH.