Un centre fer-soufre et un radical libre dans la ribonucléotide réductase anaérobie active d'Escherichia coli.

Escherichia coli cultivé anaérobiquement contient une ribonucléotide réductase sensible à l'oxygène. L'enzyme nécessite une activation anaérobie par deux fractions d'E. coli avec S-adénosylméthionine, NADPH, dithiothréitol et KCl. Nous avons maintenant découvert que le déazaflavine réduit photiquement peut se substituer à ces deux fractions et au NADPH. La réductase contenait des quantités à peu près équimolaires de fer et de sulfure, suggérant la présence d'un complexe Fe-S. Le cluster est caractérisé par une bande de transfert de charge à 420 nm et un signal EPR à basse température centré à g = 2,01 qui est difficile à saturer à 14 K, suggéré être un cluster (3Fe-4S)+. Dans cinq préparations différentes de réductase essentiellement pure en protéines contenant des quantités de fer largement différentes, l'activité catalytique corrélait bien avec le contenu en fer. Le signal de fer a disparu lors de l'activation anaérobie réductrice, avec l'apparition d'un nouveau signal EPR à g = 2,0033 montrant un comportement thermique et une saturabilité à la puissance micro-onde cohérente avec un radical libre organique. Le signal a disparu après exposition de l'enzyme activée à l'air. Nous suggérons que l'activation implique la génération d'un radical libre d'acide aminé spécifique qui dépend du cluster Fe-S réduit et de la S-adénosylméthionine. D'autres travaux semblent indiquer que le radical libre est localisé sur la glycine 681 de la chaîne polypeptidique.