Analyse cinétique des interactions récepteur/ligand des œstrogènes

La technologie de biocapteurs à résonance plasmonique de surface a été utilisée pour mesurer directement les interactions de liaison de petites molécules avec le domaine de liaison des ligands du récepteur humain des œstrogènes. En mode de dépistage, des ligands spécifiques du récepteur ont été facilement discernés des non-ligands. En mode haute résolution, les réponses de liaison aux phases d'association et de dissociation se sont révélées reproductibles et pouvaient être ajustées globalement à un modèle d'interaction simple pour extraire les constantes de taux de réaction. En moyenne, des ligands antagonistes (tels que le tamoxifène et la nafoxidine) ont été observés se lier au récepteur avec des taux d'association 500 fois plus lents que les agonistes (tels que l'estriol et le bêta-estradiol). Cette découverte est cohérente avec le fait que ces antagonistes se lient à une conformation altérée du récepteur. L'essai du biocapteur a également pu identifier de subtiles différences dans la façon dont le même ligand interagissait avec deux isoformes différentes du récepteur (alpha et bêta). La capacité du biocapteur à déterminer les constantes de taux cinétiques pour les interactions petite molécule/protéine offre des opportunités uniques pour comprendre les mécanismes associés à la formation de complexes et fournit de nouvelles informations pour optimiser les candidats médicaments.