Clonage et caractérisation d'un cDNA codant un autoantigène thyroïdien humain novateur de 70 kDa

Des clones de cDNA ont été isolés en dépistant une bibliothèque lambda gt11 de carcinome thyroïdien humain avec des immunoglobulines purifiées à partir du sérum d'un patient atteint de la maladie auto-immune de Graves. Un clone (ML8) contenant un insert de 1,25 kilobase (kb) s'est hybridé avec un unique ARNm poly(A+) de 2,0 kb dans la thyroïde humaine et les lymphocytes, mais pas dans le cerveau humain, le foie, les reins ou les muscles. De plus, cette sonde s'est également hybridée avec un unique ARNm poly(A+) de 2,0 kb provenant d'une lignée cellulaire thyroïdienne de rat (FRTL-5). Un cDNA humain apparemment complet de 2 074 paires de bases (pb) a été obtenu et séquencé. La séquence de nucléotides du cDNA de 2 074 pb comprend une séquence non codante 5' de 17 pb, un cadre de lecture ouvert de 1827 pb et une séquence non codante 3' de 222 pb. Le signal de polyadénylation canonique AATAAA est présent 18 pb en amont de la queue poly(A). Ce cDNA code pour une protéine de 69 812 daltons avec deux sites potentiels de glycosylation N-liés et au moins un domaine potentiel traversant la membrane. L'immunoprécipitation de la protéine traduite in vitro par des sérums de plusieurs patients atteints de la maladie de Graves soutient que la protéine de 69 812 daltons est un autoantigène.