Stabilité postmortem extensible de l'ARN du cerveau de rat et humain

La stabilité postmortem de l'ARN du cerveau a été mesurée dans des échantillons de rat et d'homme pendant jusqu'à 48 heures. Des cerveaux entiers de rat, refroidis à un rythme approximatif de celui des cerveaux humains en attente d'autopsie, ont été recueillis à intervalles de 0 à 48 heures après la mort et congelés. Ces échantillons ont été comparés à des cerveaux de rat fraîchement obtenus et non congelés. Deux caractéristiques potentiellement indépendantes de ces populations d'ARN ont été mesurées : la récupération ou le rendement d'ARN/gramme de tissu (quantité) et l'intégrité ou le degré de dégradation (qualité). Les rendements totaux d'ARN étaient similaires après tous les délais postmortem. L'hybridation de sondes cDNA marquées par 32P sur des blots de filtres en nitrocellulose d'ARN de cerveau de rat séparé électrophorétiquement n'a pas révélé de dégradation des ARNm spécifiques du cerveau de rat pendant la période postmortem. De même, la traduction in vitro de ces mêmes échantillons totaux d'ARN de rat a produit des produits de traduction de poids moléculaire élevé sans différences entre de longs et de courts temps postmortem. L'ARN du cortex cérébral humain a été préparé par les mêmes méthodes que celles utilisées pour le cerveau de rat à partir d'un échantillon neurochirurgical et de quatre autres donneurs avec des intervalles postmortem de 7 à 36 heures. Typiquement, le rendement total d'ARN du cerveau humain était de 40-50 % du rendement du cerveau de rat. Lorsqu'il a été analysé par des études d'hybridation de gel d'ARN, comme pour l'ARN de cerveau de rat, l'ARN cortical humain semblait légèrement dégradé. Cependant, le degré de dégradation apparente de l'ARN n'était pas lié à l'intervalle postmortem. Les produits de traduction in vitro de l'ARN cortical humain ont révélé des peptides de poids moléculaire élevé à tous les intervalles postmortem, mais une incorporation légèrement moins élevée de 35S dans ces bandes a été trouvée aux intervalles postmortem plus longs par rapport aux temps plus courts. Ensemble, ces résultats démontrent une stabilité extensive de l'ARN du cerveau qui invite à une utilisation agressive des techniques de génétique moléculaire pour l'étude des maladies neurodégénératives humaines.