Les exigences spécifiques en acides aminés d'une cellule mammifère (souche L) en culture tissulaire

De nombreuses tentatives ont été faites pour concevoir des milieux chimiquement définis qui permettraient la propagation des cellules mammifères en culture tissulaire, sans supplémentation par du sérum, du plasma ou des extraits tissulaires. À ce jour, ces tentatives n'ont pas été couronnées de succès. Bien que certains de ces milieux, notamment ceux récemment développés par Morgan, Morton et Parker (1) et par Healy, Fisher et Parker (Z), permettent la survie de certaines lignées cellulaires pendant de longues périodes, aucun n'a permis une multiplication continue par sous-culture en série. Une croissance peut être obtenue par l'ajout à ces milieux d'une petite quantité de sérum, mais le milieu n'est alors plus chimiquement défini et ne permet plus de délimiter les exigences essentielles de croissance de la cellule. Reconnaissant cette difficulté, Fischer (3) a utilisé l'expédient de supplémenter un milieu défini avec du plasma de poulet dialysé, du sérum et des extraits d'embryon, dans l'espoir que les composants essentiels de faible poids moléculaire du milieu défini puissent alors être identifiés. Lors de l'omission de cystine, d'arginine, de tryptophane, de glutamine ou d'histidine et de proline, il y avait en effet une diminution de la quantité de croissance radiale d'un explant de myoblaste d'embryon de poulet. Cependant, la croissance n'était pas empêchée, et aucun composant unique ne pouvait être rigoureusement caractérisé comme essentiel à la survie et à la croissance. À la lumière des données à rapporter ici, il est possible (a) que les matériaux de culture utilisés par Fischer n'aient pas été suffisamment dialysés, (b) que les grandes quantités de plasma et de sérum utilisées (plus de 50 pour cent en volume) contenaient des composés pouvant remplacer en partie les acides aminés, ou (c) que le diamètre de croissance radiale autour de l'explant n'était pas une véritable mesure de la prolifération cellulaire. Quoi qu'il en soit, dans le système plus simple utilisé ici, où les cellules étaient cultivées sur une surface en verre, l'ajout de petites quantités de sérum de cheval dialysé à un milieu autrement défini a permis la propagation à long terme des fibroblastes de souris adultes (souche L). Dans un tel milieu limitant, l'omission d'un seul facteur de croissance essentiel a maintenant entraîné la mort précoce de la culture, et il s'est avéré 839