Sécrétion de chlorure induite par le polypeptide intestinal vasoactif dans une lignée cellulaire épithéliale colique. Participation directe d'un système de cotransport Na+,K+,Cl- localisé au niveau basolatéral.

Nous avons utilisé une lignée cellulaire colique humaine bien différenciée, la lignée T84, comme système modèle pour étudier les voies de transport d'ions cellulaires impliquées dans la sécrétion de chlorure induite par le polypeptide intestinal vasoactif (VIP). Une chambre d'Ussing modifiée a été utilisée pour étudier les flux transepitheliaux de Na+ et Cl- à travers des cultures de monolayers confluent des cellules T84 cultivées sur des supports perméables. De manière analogue à l'intestin isolé, l'ajout de VIP a provoqué une augmentation de la sécrétion nette de Cl- qui a expliqué l'augmentation du courant de court-circuit (Isc). L'effet du VIP sur l'Isc était dose-dépendant avec une stimulation seuil à 10(-10) M de VIP, et un effet maximal à 10(-8) M. Le bumétanide a prévenu ou inversé la réponse au VIP. L'inhibition par le bumétanide s'est produite rapidement lorsqu'il a été ajouté au milieu sérosal, mais pas au milieu mucosal. Des études de remplacement d'ions ont démontré que la réponse au VIP nécessitait la présence simultanée de Na+, K+ et Cl- dans le milieu sérosal. En utilisant des techniques d'absorption d'ions cellulaires, nous décrivons une interdépendance des absorptions de 22Na+, 86Rb+ et 36Cl- sensibles au bumétanide, ce qui est indicatif d'un système de cotransport Na+,K+,Cl- dans cette lignée cellulaire. Ce chemin de transport était localisé sur la membrane basolatérale. Les vitesses initiales d'absorption extrapolées pour chacun des trois ions étaient cohérentes avec le cotransport électroneutre de 1 Na+:1 K+ (Rb+):2 Cl-. Nos résultats indiquent que la sécrétion de Cl- induite par le VIP implique intimement un système de cotransport Na+,K+,Cl- sensible au bumétanide qui est fonctionnellement localisé sur la membrane basolatérale.