공포 크기 조절: Vacuole-associated Vac14-Fig4 복합체에 의한 PtdIns(3,5)P2 수준의 조절, PtdIns(3,5)P2-특이적 인산분해효소

싹이 트는 효모 Saccharomyces cerevisiae에서 인산지질 3,5-비스포스페이트(PtdIns(3,5)P2)는 단일 인산지질 3-포스페이트 5-키나제인 Fab1에 의해 합성된다. PtdIns(3,5)P2 합성에 결핍된 세포는 비정상적으로 커진 공포 형태를 나타내며, 반면 PtdIns(3,5)P2의 농도가 증가하면 여러 개의 작은 공포가 형성되어 PtdIns(3,5)P2가 공포 크기 조절에 특정한 역할을 한다는 것을 시사한다. 유전학적 연구에 따르면 Fab1 키나제는 Vac7와 Vac14에 의해 양성 조절을 받으며, 이 중 하나의 유전자를 삭제하면 PtdIns(3,5)P2 합성이 중단되고 비정상적으로 커진 공포가 형성된다. 최근에 vac7Delta 돌연변이의 억제제가 확인되었으며, 이는 추정되는 인산인산 분해효소인 Fig4를 암호화하는 것으로 나타났다. 우리는 Fig4가 vitro에서 마그네슘에 의해 활성화되는 PtdIns(3,5)P2-선택적 인산인산 분해효소임을 증명한다. Fig4-GFP 융합 단백질의 분석 결과 Fig4 인산분해효소가 공포의 제한막에 위치한다는 것을 발견했다. 놀랍게도 Vac14가 없으면 Fig4-GFP는 더 이상 공포에 위치하지 않는다. 그러나 Fig4-GFP는 vac7 삭제 변이체의 비정상적으로 커진 공포에 계속 위치한다. 이러한 관찰과 일치하게, 우리는 Fig4가 공통의 막 관련 복합체에서 Vac14와 물리적으로 결합한다는 것을 발견했다. 우리의 연구는 Vac14가 Fab1 키나제 활성을 양성 조절하고 Fig4 PtdIns(3,5)P2 인산분해효소의 위치/활성을 유도함을 나타낸다.