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단백질체학은 암 발생 기전에 대한 답을 제공하고 단백질 발현 수준 및 활성 상태의 포괄적인 분석을 통해 표적 치료를 유도할 수 있는 잠재력을 가지고 있습니다. 이러한 잠재력을 실현하기 위해, 환자 샘플에서 단백질 배열을 수행하기 위한 새로운 신속한 고처리량 기술과 이를 해석하기 위한 새로운 분석 기법의 개발이 필요합니다. 본 문서에서는 원발 급성 골수성 백혈병 샘플과 백혈병 및 정상 줄기세포 분석을 위한 역상 단백질 배열(RPPA)의 검증 및 강건성을 설명합니다. 이 보고서에서는 배열 인쇄, 탐지, 증폭 및 염색의 정밀도가 매우 높고 재현성이 있으며 전통적인 웨스턴 블롯과 상관관계가 있음을 보여줍니다. 동일한 샘플의 복제본을 동일하거나 별도의 배열에 사용하거나 동일한 출발 샘플에서 준비된 별도의 단백질 샘플을 사용함으로써, 내부 및 외부 배열 재현성이 매우 높았습니다. 배열 설정 내에서 단백질 신호 강도에 대한 통계적으로 유의미한 차이는 감지되지 않았습니다. 활성 상태(인산화)는 여러 번 동결 및 해동된 샘플에서 지연 처리 및 준비를 테스트하는 실험에서도 유지되었습니다. 단 3개의 세포 단백질 등가물에서 신뢰할 수 있는 단백질 발현의 차이가 감지될 수 있었습니다. 드문 정상 및 백혈병 줄기세포 집단에서 준비된 RPPA는 성공적으로 수행되었으며, 세포의 대량 집단과 차이를 보였습니다. 예제는 RPPA가 목표 식별, 검증 및 약물 발견의 대규모 분석에 이상적인 방법임을 보여줍니다. 요약하자면, RPPA는 원발 급성 골수성 백혈병 세포, 세포주 및 인간 줄기세포의 단백질 발현 및 인산화 상태에 대한 신속한 대규모 단백질체 분석을 가능하게 하는 매우 신뢰할 수 있고 재현 가능한 고처리량 시스템입니다.
Tibes 외. (Sun,)은 이 질문을 연구했습니다.
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