Resumen A005: Un ensayo de compromiso de objetivo PRMT5 NanoBRET™ de células vivas que indaga sobre los modos de inhibición competitivos y no competitivos

El PRMT5 es una metiltransferasa de arginina esencial que regula un amplio espectro de procesos celulares mediante la metilación de sustratos histónicos y no histónicos. En la catálisis del PRMT5, el SAM actúa como cofactor y donante del grupo metilo, generando un moiety guanidinio metilado en el sustrato objetivo. En células normales, las reservas de SAM se mantienen a través de la vía de rescate de metionina. En el 15% de los cánceres, una enzima clave en esta vía (MTAP) está eliminada, lo que lleva a una acumulación del intermedio MTA, que inhibe la actividad del PRMT5. Esta pérdida de función genética ha sido perseguida como una vulnerabilidad colateral en los cánceres con deleción de MTAP. Para explotar esta letalidad sintética, se han desarrollado varios inhibidores novedosos (como el MRTX1719) que se unen cooperativamente en el complejo PRMT5/MTA, ofreciendo un camino convincente hacia la medicina de precisión. Aquí describimos un nuevo ensayo de compromiso de objetivo NanoBRET™ de células vivas que permite estudios mecanicistas sobre una variedad de inhibidores del PRMT5. Usando una sonda NanoBRET permeable a células dirigida al bolsillo del sustrato de PRMT5, se puede cuantificar el compromiso competitivo tanto de sustrato como de cofactor en células. Además, este método se puede utilizar para cuantificar el compromiso de objetivo no competitivo de MTA en células, proporcionando una plataforma para medir la potencia de la formación del complejo ternario de fármacos PRMT5-MTA. Este método sirve como un método de primera clase para cuantificar el compromiso de objetivo no competitivo en células vivas, que puede aplicarse a otros sistemas de modelos. Formato de cita: Kelly A. Teske, Ani Michaud, Elisabeth Rothweiler, Cesear Corona, Kaitlin Dunn Hoffman, Jennifer Wilkinson, Michael Beck, James Vasta, Kilian Huber, Matthew Robers. Un ensayo de compromiso de objetivo PRMT5 NanoBRET™ de células vivas que indaga sobre los modos de inhibición competitivos y no competitivos. En: Actas de la Conferencia Especial de la AACR en Investigación del Cáncer: Expandiendo y Traduciendo Vulnerabilidades Sintéticas del Cáncer; 2024 Jun 10-13; Montreal, Quebec, Canadá. Filadelfia (PA): AACR; Mol Cancer Ther 2024;23(6 Supl):Resumen nr A005.