FOXP3-TSDR의 표적 탈메틸화가 STAT6 결핍 유도 T 조절 세포의 억제 능력을 향상시킨다

인 비트로에서 유도된 T 조절 세포(iTregs)는 염증 유발 질환을 해결하기 위한 유망한 후보이다. 그러나 현재 iTregs의 생성 및 확장을 위한 프로토콜은 조절 T 세포(Tregs)의 주 조절기로 인식되는 FOXP3 유전자의 Treg 특정 탈메틸화 영역(TSDR)의 광범위한 탈메틸화를 유도하지 못한다. 이 부족은 Foxp3 발현의 빠른 손실과 불안정한 조절 표현형을 초래한다. 그럼에도 불구하고, STAT6 신호 전달 억제는 iTregs에서 Foxp3 발현을 효과적으로 안정화시킨다. 따라서 이 연구는 STAT6 결핍과 에피제네틱 편집을 결합한 프로토콜을 개발하여 iTregs의 안정적인 억제 기능 및 기능적 표현형 유지 능력을 개선하는 것을 목표로 하였다. 우리의 결과는 STAT6 결핍(STAT6-/-)과 CRISPR-TET1 도구를 활용한 TSDR의 표적 탈메틸화의 조합이 FOXP3-TSDR의 광범위한 탈메틸화를 초래함을 보여준다. STAT6-/- iTregs의 탈메틸화는 Foxp3와 CTLA-4, PD-1, IL-10 및 TGF-β와 같은 억제 표지자의 발현 증가와 관련이 있었다. 게다가, 편집된 STAT6-/- iTregs는 CD8+ 및 CD4+ 림프구를 억제하는 능력이 증가했으며, 전통적인 iTregs에 비해 Th1 서명 유전자 발현을 더 효율적으로 저해할 수 있다. 결론적으로, STAT6의 비활성화 및 CRISPR-TET1을 통한 TSDR 표적 탈메틸화는 iTregs의 안정성이 높아지고 억제 능력이 증가하도록 유도하는 데 충분하며, 염증 및 자가면역 질환에 대한 잠재적인 응용 가능성을 제시한다.