초록 3596: 대장암 및 간 전이에 있어 TCR 편집 T 세포의 기능성을 향상하기 위한 종양 미세환경의 대사 재프로그램화

초록 고형 악성종양에서 T 세포의 기능성은 종양 미세환경(TME) 내의 대사 재프로그램화와 얽혀 있으며, 이는 암세포의 에너지 요구 증가를 지원하고 면역 침윤 세포의 효과 기능 및 사이토카인 생산을 억제합니다. 일차 대장암(CRC) 및 관련 간 전이에서 우리는 대량의 전사 재편성으로 인한 변동성을 드러내었으며, 대사 경로가 이 변동성의 주요 요인 중 하나였습니다. 이에 따라 CD39 및 CD73에 의해 ATP의 가수분해를 위해 TME 내에 축적된 세포외 아데노신은 A2A 수용체(A2Ar)에 선택적으로 결합하여 면역 억제 활성을 발휘하는 새로운 억제 매개체로 인식되었습니다. 고차원 유세포 분석을 통해 우리는 CD39가 일차 및 전이성 CRC에서 T 세포 탈진의 주요 원인임을 밝혔습니다. 따라서 우리는 TCR 편집 T 세포(TCRED)의 CD39를 차단하고자 하였습니다. CRISPR/Cas9를 사용하여 CD39를 암호화하는 ENTPD1 유전자와 함께 내재 TCR의 α 및 β 체인을 모두 파괴하고 HER2 항원에 대한 T 세포 특이성을 재지정했습니다. TCREDCD39KO T 세포는 일차 및 전이성 종양에서 환자 유래 오르가노이드(PDO)를 제거하는 데 있어 유능한 대조군보다 우수한 성능을 보였습니다. CD39가 아데노신 생산을 유도하는 생화학적 연쇄 반응을 시작하는 역할을 고려할 때, 우리는 TCREDCD39KO T 세포에서 관찰된 기능적 이점에 대한 아데노신의 직접적인 역할을 조사하고자 하였습니다. 우리는 아데노신의 존재 여부에 따라 목표 세포에 우리의 세포 제품을 시험했으며, TCREDCD39KO T 세포가 사이토카인을 방출하는 능력에서 유능한 대조군보다 우수하다는 것을 관찰했습니다. 그러나 아데노신이 존재할 때 이 효과는 완전히 제거되었습니다. 또한 TCREDCD39KO T 세포가 PDO와 시험했을 때, 외부에서 추가된 아데노신이 CD39 KO로 인한 기능적 죽임 우위를 무효화했습니다. 경로에 대한 더 많은 통찰을 얻기 위해 우리는 TCREDA2ArKO T 세포도 생성하였습니다. ATP/아데노신 경로에서 CD39와 A2AR의 서로 다른 역할에 따라 아데노신 수용체의 차단은 오직 아데노신이 존재할 때 PDO 제거에서 상당한 이점을 초래했습니다. 우리는 T 세포의 대사 능력에 대한 CD39KO의 영향을 평가하고 TCREDCD39KO T 세포가 해당당 증식 기능보다 미토콘드리아 기능에 더 의존할 가능성이 크다는 것을 밝혔습니다. 이는 더 높은 기능성과 지속성을 설명합니다. CD39 KO의 대사적 효과에 대한 추가 평가는 현재 진행 중입니다. 전반적으로 우리는 ATP/아데노신 연쇄 반응이 T 세포의 기능성과 대사 상태와 관련이 있으며, 면역 억제 TME에 맞서기 위한 적응세포 치료 전략에 활용될 수 있음을 보여주었습니다.