A depleção de células T regulatórias intratumorais e o antagonismo de CTLA-4 são necessários para a máxima eficácia dos anticorpos anti-CTLA-4

Os anticorpos anti-CTLA-4 provocaram com sucesso a regressão tumoral duradoura na clínica; no entanto, o benefício a longo prazo é limitado a um subconjunto de pacientes para indicações de câncer selecionadas. A compreensão incompleta de seu mecanismo de ação dificultou os esforços para melhorá-los, com hipóteses conflitantes propondo tanto o antagonismo do eixo CTLA-4:B7 quanto a depleção mediada por efeito Fc de células T regulatórias (Treg) como determinantes da eficácia. Aqui, relatamos a engenharia de um domínio de ligação a CTLA-4 não antagonista (b1s1e2) que depleta Tregs intratumorais como uma fusão Fc. A comparação de b1s1e2-Fc com 9d9, um anticorpo anti-CTLA-4 antagonista, permitiu interrogar as contribuições separadas do antagonismo de CTLA-4 e da depleção de Treg para a eficácia. Apesar de níveis equivalentes de depleção de Treg intratumoral, 9d9 alcançou mais curas a longo prazo do que b1s1e2-Fc em tumores MC38, demonstrando que o antagonismo de CTLA-4 proporcionou um benefício adicional de sobrevivência. Consistente com relatos anteriores que sugerem que o antagonismo de CTLA-4 melhora a primeação, o tratamento com 9d9, mas não com b1s1e2-Fc, aumentou a porcentagem de células T ativadas no linfonodo dreno do tumor (tdLN). A depleção de Treg com qualquer um dos construtos foi restrita ao tumor devido à expressão insuficiente de CTLA-4 na superfície das Tregs em outros compartimentos. Através da administração intratumoral de toxina diftérica em camundongos Foxp3-DTR, mostramos que a depleção de Tregs intratumorais e nodais proporcionou um benefício de sobrevivência ainda maior do que 9d9, consistente com a contenção induzida por Treg da primeação no tdLN. Nossos dados demonstram que as terapias anti-CTLA-4 exigem tanto o antagonismo de CTLA-4 quanto a depleção de Treg intratumoral para máxima eficácia—mas que potenciais terapias futuras também capazes de depletar Tregs nodais poderiam mostrar eficácia na ausência de antagonismo de CTLA-4.