Los canales mecanosensibles (MSCs) son críticos para que las células puedan detectar y responder a estímulos mecánicos. Los MSCs se expresan ampliamente, y los defectos en la mecano-transducción se asocian con numerosas enfermedades. MSCs es un canal bacteriano regulador de turgor ubicuo que se utiliza como sistema modelo para toda la familia de canales en procariontes y eucariontes. Las estructuras existentes de los MSCs de E. coli se dividen en dos categorías: (1) estructuras no conductivas y desfasadas con una compuerta desacoplada, que se observan típicamente en presencia de lípidos de cadena regular, y (2) estructuras semi-conductivas y expandidas, observadas en muestras deslipidizadas o en presencia de lípidos de cadena corta. El mutante G168D de los MSCs no presenta inactivación dependiente de tensión en electrofisiología de patch-clamp, ha disminuido drásticamente su viabilidad osmótica y no adopta la conformación no conductiva y desfasada asociada al estado inactivado bajo las condiciones utilizadas en nuestros estudios de cryo-EM. La glicina 168 se sitúa en la interfaz compacta entre la hélice TM3b, que corre paralela a la membrana, y el dominio β que forma la parte superior de la jaula cito-plásmica. La desestabilización del estado inactivado causada por un aspartato cargado y más voluminoso en este sitio sugiere que estos contactos pueden no estar presentes en el estado cerrado. Nuestra estructura de G168D en micelas mixtas muestra un estado semi-abierto con hélices TM3 parcialmente rectas y un contacto TM3b-β suelto. Curiosamente, las partículas se dividieron entre heptámeros regulares y un subconjunto menor de octámeros. Los contactos intersubunitarios en ambas estequiometrías parecen similares, y el patch-clamp no muestra desviación de la conductancia de canal unitario estándar de 1.1 nS. Basados en la baja fidelidad en el ensamblaje complejo de este mutante no inactivante, hipotetizamos que el estado inactivado puede ser integral a la etapa inicial de ensamblaje de los canales MSCs recién sintetizados a partir de protómeros.
Moller et al. (Sun,) estudiaron esta cuestión.