等温増幅法を用いたSARS-CoV-2の検出とサンプルの不活化および精製のための迅速で安価なプロトコル

現在の重症急性呼吸器症候群コロナウイルス2型（SARS-CoV-2）パンデミックは、世界中の社会に計り知れない影響を及ぼしており、多くの人々の命と生計を脅かしています。経済が適切な予防措置を講じずに再開し始めると、その影響はさらに大きくなり悪化するでしょう。そこで、私たちは、現在の試薬に対応した感度の高い逆転写ループ媒介等温増幅（RT-LAMP）アッセイを開発しました。このアッセイは、わずか30分でカラーメトリックな読み取りを利用します。また、ウイルス粒子と内因性ヌクレアーゼを不活化できる迅速な不活化プロトコルが最適化され、感度とサンプルの安定性が向上しました。このプロトコルとRT-LAMPアッセイを組み合わせることで、サンプル内のウイルスRNAコピーを1マイクロリットルあたり少なくとも50コピー検出できます。感度をさらに向上させるために、この不活化法に対応した精製プロトコルが開発されました。不活化および精製プロトコルとRT-LAMPアッセイを組み合わせることで、サンプル内のウイルスRNAコピーを1マイクロリットルあたり少なくとも1コピーまで感度が向上します。このシンプルな不活化および精製パイプラインは安価で、他の下流のRNA検出プラットフォームと互換性があり、容易に入手可能な試薬を使用します。これは、SARS-CoV-2の検査の可用性を高め、この検査を実施できる設定を拡大するはずです。