Caracterização celular do gene da actina relacionado a mecanismos dependentes de contato em Naegleria fowleri

A ameba de vida livre, Naegleria fowleri, destrói células-alvo através de mecanismos dependentes de contato, como fagocitose e/ou trogocitose. Um experimento anterior mostrou que o gene nf-actina consistia em 1,2 kbp, produzia uma proteína recombinante de 50,1 kDa (Nf-actina) e estava localizado no citoesqueleto, pseudópodes e amebastoma. Neste estudo, foi realizada a caracterização celular do gene nf-actina relacionado aos mecanismos dependentes de contato em N fowleri. O gene nf-actina foi amplificado a partir de um vetor clonado por genes, pEXQP5-T7/NT TOPO. O gene nf-actina foi introduzido no vetor Ubi-pEGFP-C2, e Ubi-pEGFP-C2/nf-actina foi transfectado em trofozoítos de N fowleri. Uma forte fluorescência de GFP foi detectada em trofozoítos de N fowleri transfectados com Ubi-pEGFP-C2/nf-actina. A expressão da proteína EGFP-Nf-actina foi detectada por análise de Western blot. Os N fowleri que sobreexpressaram nf-actina mostraram uma atividade de adesão significativamente aumentada em relação a componentes da matriz extracelular, fibronectina, colágeno I e fibrinogênio, em comparação com o N fowleri selvagem. Além disso, os N fowleri que sobreexpressaram nf-actina mostraram atividade fagocítica e citotoxidade aumentadas em comparação com o N fowleri selvagem. Em resumo, o gene nf-actina sobreexpresso tem uma função importante na capacidade de aumentar a adesão celular, citotoxicidade e fagocitose por N fowleri.