Clonagem e sequência de cymA, um gene que codifica um citocromo c tetraheme necessário para a redução de ferro(III), fumarato e nitrato por Shewanella putrefaciens MR-1

O gene cymA, que codifica um citocromo c tetraheme, foi clonado de Shewanella putrefaciens MR-1. Esse gene complementou um mutante que tinha uma inserção de TnphoA em cymA e que era deficiente na redução respiratória de ferro(III), nitrato, fumarato e manganês(IV). A sequência de nucleotídeos de 561 pb de cymA codifica uma proteína de 187 aminoácidos com uma massa molecular prevista de 20,8 kDa. Nenhuma sequência de sinal N-terminal foi prontamente aparente; consistente com isso, um citocromo com tamanho de 21 kDa foi detectado no tipo selvagem, mas estava ausente no mutante de inserção. O gene cymA é transcrito em um mRNA; o transcrito principal tinha aproximadamente 790 bases, sugerindo que não faz parte de um operon multicistrônico. Este transcrito de RNA não foi detectado no mutante cymA. A proteína CymA foi encontrada na membrana citoplasmática e na fração solúvel de MR-1, e compartilha homologia parcial de sequência de aminoácidos com citocromos c multiheme de outras bactérias. Esses citocromos estão ostensivamente envolvidos na transferência de elétrons da membrana citoplasmática para acceptores no periplasma. A localização das redutases de fumarato e de ferro(III) no periplasma e na membrana externa de MR-1, respectivamente, sugere a possibilidade de um papel similar de transferência de elétrons para CymA.