Clasificación y localización distinta de proteínas en premelanomasomas, melanomasomas y lisosomas en células melanocíticas pigmentadas✪

Los melanomasomas y premelanomasomas son orgánulos relacionados con lisosomas que poseen una estructura única y un conjunto de proteínas residentes. Hemos posicionado estos orgánulos en relación con endosomas y lisosomas en células de melanoma pigmentado y melanocitos. Las proteínas residentes en melanomasomas, Pmel17 y TRP1, se localizaron en estructuras vesiculares separadas que eran diferentes de aquellas enriquecidas en proteínas lisosomales. En cortes criotécnicos ultradelgados etiquetados con inmunogold, Pmel17 estaba más enriquecido a lo largo de las estriaciones intraluminales de premelanomasomas. Un aumento de la pigmentación se acompañó de una disminución en Pmel17 y un aumento en TRP1 en la membrana limitante. Ambas proteínas estaban mayormente excluidas de los compartimentos lisosomales enriquecidos en LAMP1 y catepsina D. Mediante análisis cinético de la captura en fase fluida y etiquetado con inmunogold, se segregaron proteínas premelanomosomales de marcadores endocíticos dentro de un compartimento endosomal inusual. Este compartimento contenía Pmel17, fue accedido por BSA-oro después de 15 minutos, era ácido y mostraba un manto planar citoplasmático que contenía clatrina. Nuestros resultados indican que los premelanomasomas y melanomasomas representan una línea de orgánulos distinta, separable de endosomas y lisosomas convencionales en células pigmentadas. Además, implican un compartimento endosomal inusualmente recubierto de clatrina como un sitio desde el cual se clasifican las proteínas destinadas a premelanomasomas y lisosomas.