La perforina forma poros transitorios en la membrana plasmática de la célula objetivo para facilitar el acceso rápido de granzimas durante el ataque de las células asesinas

Los linfocitos citotóxicos juegan un papel clave en la homeostasis inmunitaria al eliminar células objetivo infectadas por virus y transformadas a través de la entrega dependiente de perforina de granzimas proapoptóticas. Sin embargo, el mecanismo de entrada de granzimas en las células sigue sin resolverse. Utilizando enfoques bioquímicos combinados con microscopía de seguimiento temporal de linfocitos citotóxicos primarios humanos que interactúan con sus respectivos objetivos, definimos la duración de la formación de poros de perforina en el contexto de la sinapsis inmunitaria fisiológica. Mostramos que, al reconocer los objetivos, el flujo de calcio hacia el linfocito condujo a la exocitosis de perforina y la permeabilización de la célula objetivo en tan solo 30 segundos. Dentro de la hendidura sináptica, la permeabilización de la célula objetivo por perforina resultó en la difusión rápida de granzimas derivadas del medio extracelular. La reparación de estos poros se inició dentro de 20 segundos y se completó en 80 segundos, limitando así la difusión de granzimas. Notablemente, incluso un marco de tiempo tan corto fue suficiente para la entrega de cantidades letales de granzimas en la célula objetivo. La rápida iniciación de la apoptosis fue evidente por la redondez dependiente de caspasas de la célula objetivo dentro de los 2 minutos posteriores a la permeabilización por perforina. Este estudio define la secuencia final de eventos que controlan la defensa inmunológica de los linfocitos citotóxicos, en la que los poros de perforina se ensamblan en la membrana plasmática de la célula objetivo, asegurando la entrega eficiente de granzimas letales.