Una sonda de gen de ARN ribosómico diferencia especies miembros del complejo Anopheles gambiae

Un fragmento de ADN de 0.59 kilobases clonado de un cistrón de rDNA del mosquito Anopheles gambiae puede ser utilizado como sonda para diferenciar entre A. gambiae, A. arabiensis y A. melas, tres especies hermanas morfológicamente idénticas en el complejo A. gambiae que, de otro modo, solo pueden ser diferenciadas de manera confiable mediante patrones de bandas de cromosomas politénicos. Aunque todas son vectores importantes (y a menudo simpátricos) de malaria en África, sus roles relativos en la transmisión de malaria han sido hasta ahora difíciles de evaluar. La sonda, un fragmento EcoRI-SalI del extremo 3' de la región codificante beta del 28S del cistrón, está presente en las tres especies, pero las especies difieren de manera única con respecto a la ubicación de un sitio EcoRI en el espaciador no transcrito (NTS) aguas abajo del fragmento. Hemos utilizado rutinariamente la sonda para identificar los mosquitos del complejo A. gambiae a nivel de especie sobre la base de ADN genómico extraído de especímenes individuales secados al aire. Un solo abdomen de mosquito proporciona más que suficiente ADN para el ensayo, y ni los huevos ni una comida de sangre en el abdomen interfieren con el rendimiento de ADN. Además, el procedimiento de extracción de ADN no degrada la IgG de la comida de sangre, por lo que el pellet de proteína residual puede ser utilizado para identificar la fuente de la comida de sangre del mosquito. Dado que la organización del cistrón de rDNA, según lo detectado por la sonda, no difiere entre mosquitos machos y hembras, la sonda puede ser utilizada para cualquier sexo. Experimentos preliminares muestran que la sonda es igualmente útil para larvas y pupas de mosquito.