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Atualmente, há uma falta de um método para monitorar precisamente o progresso das reações de amplificação isotérmica por meio de sondas fluorescentes específicas de sequência, como a sonda TaqMan usada no sistema PCR. Aqui, criamos um método de amplificação isotérmica mediada por sonda fluorescente circular (CFPA). Este novo método utiliza duas sondas fluorescentes circulares e polimerase de DNA Bst para construir uma estrutura sobreposta que pode ser cortada pela endonuclease 1 específica de estrutura de aba, separando os grupos de fluorescência e desativação nas sondas. Os resultados mostraram sensibilidade para cópia única, especificidade ultralta, estabilidade (C.V. 0,05). Em resumo, apresentamos uma nova abordagem de amplificação isotérmica, confiável e precisa para aplicações em pesquisa biomédica e diagnóstico clínico preciso de infecções por patógenos.
Ye et al. (Fri,) estudaram essa questão.
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