사람 면역결핍 바이러스 유형 1 비절단 및 다중 절단 RNA 및 프로바이럴 DNA의 정량을 위한 세미네스티드 실시간 역전사 PCR 기반의 고감도 방법

고활성 항레트로바이러스 요법(HAART)은 인간 면역결핍 바이러스 유형 1(HIV-1) 감염 치료의 표준 치료법으로, 플라즈마에서 바이러스 RNA 부하를 측정하여 그 효과를 평가합니다. 플라즈마 내 HIV-1 부하가 상업적 검사의 검출 한계 아래로 유지될 때 환자는 성공적으로 치료된 것으로 간주됩니다. 그러나 HAART를 받고 있는 환자에서도 바이러스 복제와 진화가 계속 진행되어 결국 약물 내성 HIV-1 변종과 치료 실패로 이어질 수 있습니다. 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)에서 이러한 저수준의 바이러스 복제를 모니터링하기 위해서는 HIV-1 분자 마커를 측정하기 위한 민감한 방법이 필요합니다. 우리는 PBMC에서 비절단 및 다중 절단 HIV-1 RNA 및 프로바이럴 DNA의 정량화를 위한 고감도 방법의 개발을 보고합니다. 이 방법은 실시간 PCR의 정확성과 정밀성, 그리고 네스티드 PCR의 민감성을 결합한 혁신적인 세미네스티드 실시간 역전사 PCR(RT-PCR)에 기반합니다. 우리는 새로 개발된 방법이 임상 샘플에서 HIV-1 RNA 및 DNA의 정량적 검출의 감도, 정확성, 동적 범위 및 힘 면에서 기존의 단일 단계 실시간 RT-PCR보다 우수하다는 것을 보여줍니다. 이러한 수행이 용이한 방법은 바이러스 복제의 세포내 과정을 모니터링하기 위해 임상 연구를 포함한 광범위한 연구에 널리 사용될 수 있습니다.