Proteção Enzimática N- e C- em Produtos Naturais de RiPP de Cianobactinas

Inovações recentes na biossíntese de produtos naturais peptídicos revelam uma surpreendente riqueza de reações bioquímicas previamente não caracterizadas que têm aplicações potenciais em biologia sintética. Entre elas, as cianobactinas são notáveis porque esses peptídeos são protegidos em suas extremidades N- e C- por macrociclização. Aqui, usamos uma nova enzima bifuncional AgeMTPT para proteger peptídeos lineares, anexando grupos prenil e metil em suas extremidades N- e C- livres. Usando essa protease de peptídeos em combinação com outras enzimas biossintéticas modulares, descrevemos a síntese total do produto natural aeruginosamida B e a biossíntese de produtos naturais de cianobactinas lineares. Nossos estudos ajudam a definir o mecanismo enzimático da macrociclização, fornecendo evidências contra a hipótese de exclusão de água da transpeptidação e favorecendo a hipótese de labilidade cinética.