Nécessité des ions calcium dans la clivage phosphodiestérique de phosphatidyl-myo-inositol 4,5-bisphosphate stimulé par l'acétylcholine dans le muscle lisse de l'iris du lapin

Le mécanisme de dégradation de phosphatidyl-myo-inositol 4,5-bisphosphate stimulée par l'acétylcholine et sa dépendance au Ca(2+) extracellulaire ont été étudiés dans le muscle lisse de l'iris du lapin. 2. L'acétylcholine (50µm) a augmenté la dégradation du phosphatidylinositole bisphosphate dans le muscle marqué par (3)H-inositol de 28 % et le marquage du phosphatidylinositole de 24 % par rapport au témoin. Dans les mêmes conditions expérimentales, il y a eu une augmentation de 33 et 48 % de la production de (3)H-inositol trisphosphate et d'inositol monophosphate respectivement. De même, la carbamoylcholine et l'ionophore A23187 ont augmenté la production de ces phosphates inositol solubles dans l'eau. Peu de changement a été observé dans l'activité radioactive (3)H de l'inositol bisphosphate. 3. Tant l'inositol trisphosphatase que l'inositol monophosphatase ont été démontrés dans les fractions subcellulaires de ce tissu et l'activité spécifique de la première était plusieurs fois plus élevée que celle de la seconde. 4. La production d'inositol trisphosphate et d'inositol monophosphate stimulée par l'acétylcholine a été inhibée par l'atropine (20µm), mais pas par la tubocurarine (100µm) ; elle a été complètement abolhee par le depletion du Ca(2+) extracellulaire avec EGTA, mais rétablie par l'ajout de faibles concentrations de Ca(2+) (20µm). 5. Des agents antagonistes du calcium, tels que le vérapamil (20µm), la dibenamine (20µm) ou La(3+) (2mm), ont également aboli la production des phosphates inositol solubles dans l'eau en réponse à l'acétylcholine. 6. La libération d'inositol trisphosphate à partir du phosphatidylinositol bisphosphate exogène par la fraction microsomale du muscle iris ('microsomes') a été stimulée de 43 % en présence de 50µm-Ca(2+). 7. Les résultats indiquent qu'une augmentation de l'influx de Ca(2+) dans le muscle lisse de l'iris par l'acétylcholine et l'ionophore A23187 active fortement la phosphodiestérase de phosphatidylinositole bisphosphate et augmente par la suite la production d'inositol trisphosphate et de son produit hydrolytique inositol monophosphate. L'augmentation marquée observée dans la production d'inositol monophosphate pourrait également résulter de l'activation Ca(2+) de la phosphodiestérase de phosphatidylinositole. Cependant, il n'y avait pas de diminution concomitante de l'activité radioactive (3)H de ce phospholipide.