La expresión del gen Foxp3 mediada por TGF-β es regulada cooperativamente por Stat5, Creb y AP-1 a través de CNS2

Foxp3 desempeña un papel importante en el desarrollo y la función de las células T reguladoras (Treg). Tanto la inducción como el mantenimiento de la expresión del gen Foxp3 son controlados por varias regiones regulatorias, incluyendo dos potenciadores en las secuencias no codificantes conservadas (CNS). Las funciones del Potenciador 1 en CNS1 están bien establecidas, mientras que las del Potenciador 2 en CNS2 siguen siendo poco claras. Aunque CNS2 contiene actividad de potenciador, las secuencias de CpG metiladas en esta región impiden la expresión del gen Foxp3 en las células T Foxp3(-). Sin embargo, estas secuencias son desmetiladas en Treg Foxp3(+) por mecanismos aún desconocidos. Para investigar el papel de CNS2, hemos determinado la secuencia central del Potenciador 2 mediante ensayos de reportero de luciferasa en ausencia de metilación para excluir el efecto inhibitoria y hemos demostrado que los factores de transcripción AP-1, Stat5 y Creb cooperan en la regulación de la actividad del Potenciador 2. Luego hemos determinado la sensibilidad a la metilación de cada uno de los factores de transcripción. Se encontró que AP-1 es sensible a la metilación, como se ha descrito anteriormente para Creb. Sin embargo, Stat5 fue activo incluso cuando su sitio de unión en CNS2 estaba metilado. La unión de Stat5 al Potenciador 2 ocurrió temprano y precedió a la de AP-1 y Creb durante la inducción de Treg. Además, la activación de Stat5 depende del señalización de TGF-β a través del bloqueo mediado por Smad3 de la expresión de Socs3. Estos hallazgos sugieren que Stat5 es un regulador clave para abrir la región de CNS2 durante la inducción de Treg inducida, mientras que AP-1 y Creb mantienen la actividad del Potenciador 2.