सॉल्यूशन में प्रोटीन के आणविक द्रव्यमान निर्धारण की सटीकता छोटे कोणीय एक्स-रे स्कैटरिंग द्वारा

छोटे कोणीय एक्स-रे स्कैटरिंग (SAXS) प्रयोगों से निकाले जाने वाले एक सबसे महत्वपूर्ण समग्र मानकों में से एक है विलयन में घुलनशील पदार्थ का आणविक द्रव्यमान (MM)। विशेष रूप से, एक मोनोडिस्पर्स प्रोटीन सॉल्यूशन के लिए, घुलनशील पदार्थ का MM शून्य कोण पर परिवर्तनशील स्कैटरिंग तीव्रता I(0) से गणना की जाती है। SAXS द्वारा MM का मूल्यांकन oligomeric स्थिति और समाधान में असामान्य संघनन की अनुपस्थिति के बारे में मूल्यवान जानकारी प्रदान करता है। MM का मान ज्ञात MM के साथ एक प्रोटीन मानक की तुलना करके या, उदाहरण के लिए, पानी की स्कैटरिंग का उपयोग करके निरपेक्ष स्कैटरिंग तीव्रता निर्धारित करके अनुमानित किया जा सकता है। दोनों मामलों में, घुलनशील पदार्थ के क्षणभंगुर अनुपात और प्रोटीन के आंशिक विशिष्ट आयतन की जानकारी आवश्यक है। MMs की माप लेकर 13 अच्छी तरह से वर्णित ग्लोब्युलर प्रोटीनों का जिनकी MMs 13.7 से 669 kDa के बीच हैं, हम संभावित प्रणालीगत विचलनों के स्रोतों का विश्लेषण करते हैं और SAXS का उपयोग करके MM निर्धारण की सटीकता का मूल्यांकन करते हैं। डेटा यह संकेत करता है कि इन सभी प्रोटीनों का आंशिक विशिष्ट आयतन का लगभग एक समान 'प्रभावी' मान लगभग 0.7425 cm3 g−1 है। यह दिखाया गया है कि SAXS द्वारा आणविक द्रव्यमान निर्धारण के लिए अंतर-प्रोटीन और पानी का कैलिब्रेशन दोनों का उपयोग किया जा सकता है और अधिकांश मामलों में त्रुटियां 10% से अधिक नहीं होती हैं।