El uso de hibridomas híbridos para dirigir linfocitos T citotóxicos humanos

Este estudio describe una estrategia general para producir anticuerpos monoclonales híbridos capaces de dirigir linfocitos T citotóxicos humanos (CTL) contra cualquier célula que porte el antígeno objetivo apropiado. Esto se logra fusionando un hibridoma anti-T3, sensible a HAT y resistente a G418, con células esplénicas inmunes (o con otros hibridomas) que producen anticuerpos contra el antígeno objetivo deseado. En los hibridomas híbridos, el reordenamiento de las cadenas pesadas y ligeras de Ig resulta en la producción de moléculas de anticuerpo bifuncionales. Debido a su doble especificidad, estos anticuerpos son capaces de unir CTL humanos a células objetivo y desencadenar función citotóxica. Hemos aislado varios hibridomas híbridos estables en los que una especificidad es contra T3 y una otra contra antígenos HLA (clase II, DC-1, A3), Ig humana (IgM, IgE, kappa), Toxoplasma gondii o un antígeno asociado al carcinoma de ovario. En todos estos casos, mostramos que los sobrenadantes de cultivo pueden dirigir eficaz y específicamente cualquier clon de CTL contra cualquier célula objetivo que posea el antígeno de superficie relevante reconocido por el anticuerpo. Además, la muerte celular requiere tan solo 0.1 ng/ml de anticuerpo, ocurre en relaciones de efector a objetivo comparables a las utilizadas en ensayos citotóxicos convencionales y no afecta a células vecinas. La muerte no específica de células positivas para el receptor Fc puede evitarse utilizando fragmentos F(ab')2. Como ejemplo, mostramos que es posible cambiar la clase del complejo principal de histocompatibilidad y la aloespecificidad de un clon de CTL y dirigir CTL contra antígenos no del complejo principal de histocompatibilidad como Ig, parásitos y antígenos asociados a tumores.