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抑制引き算ハイブリダイゼーション(SSH)と呼ばれる新しく非常に効果的な手法が、引き算されたcDNAライブラリの生成のために開発されました。これは、最近説明された抑制PCRと呼ばれる技術に主に基づいており、ノーマライゼーションと引き算を一つの手順で組み合わせています。ノーマライゼーションステップはターゲット集団内のcDNAの豊富さを均一化し、引き算ステップはターゲットとドライバー集団の共通配列を除外します。モデルシステムでは、SSH技術により、一回の引き算ハイブリダイゼーションで稀な配列が1,000倍以上濃縮されました。その有用性を示すために、精巣特異的cDNAライブラリを生成し、引き算されたcDNA混合物をハイブリダイゼーションプローブとして使用して、人間Y染色体コスミドライブラリ内の相同配列を特定しました。分離されたコスミドにおける人間のDNAインサートは、精巣特異的な方法で発現していることがさらに確認されました。これらの結果は、SSH技術が疾患、発生、組織特異的、または他の異なる発現遺伝子の同定のための多くの分子遺伝学的および位置クローニング研究に適用可能であることを示唆しています。
Diatchenko et al.(火曜日)、この問題を研究しました。
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