이 전임상 연구는 심방 심근세포에서 자극된 ANF 분비가 이중 양상임을 보여주며, 초기에는 세포 내 칼슘에 의존하고 지속적인 분비에는 세포 외 칼슘에 의존한다.
칼슘이 흥분-분비 및 흥분-수축 결합 모두에 관여하므로, 심방 심근세포에서 심방 나트륨 이뇨 호르몬 (ANF) 분비에 대한 그 관여를 평가하는 것이 관심사였다. 생리적 수준의 칼슘(1.4 mM)을 포함한 배양액에서, 1차 심방 세포에서 ANF의 분비는 KCl, 페닐에프린 및 내피세포(ET)를 포함한 다양한 물질에 의해 3배에서 6배로 자극되었다. 그러나 2 nM 칼슘이 포함된 배양액에서는 KCl이 ANF 분비를 기저 수준 이상으로 증가시킬 수 없었고, 페닐에프린과 ET의 자극 효과는 부분적으로만 감소하였다. 니페디핀 또는 베라파밀은 KCl, 페닐에프린 및 ET에 의한 ANF 분비에 대한 2 nM 칼슘 배양액의 효과를 모방할 수 있었다. 운동학적 연구에 따르면, ET 자극 분비의 처음 5분 동안 세포는 세포 외 칼슘에 대한 필요성이 거의 없었으나, 10분에서 2시간 사이의 지속적인 분비 동안 이 필요성이 더 뚜렷하게 나타났다. 또한, ET에 의한 ANF 분비의 자극은 ET 적용 후 10분에 기저 수준의 약 15배로 증가하였고, 그 이후에는 분비 비율이 약 3-4배 감소하여 2시간까지 지속적으로 이 수준을 유지하였다. 모든 형태의 자극된 분비는 이온미신 매개 세포 내 칼슘 풀의 고갈을 통해 억제될 수 있었다. 이를 종합하면, 심방 심근세포는 최대 자극 ANF 분비율을 지원하기 위해 세포 외 및 세포 내 칼슘 모두를 필요로 하며, 세포 내 칼슘 풀은 분비의 초기 단계에서 사용될 수 있는 반면, 세포 외 칼슘 공급원은 지속적 분비 단계에서 중요할 수 있음을 나타낸다.
Sei et al. (1990)가 이 질문을 연구하였다.