Mucin-4 (MUC4)는 각막의 정점 글리코칼릭스에서 중요한 막 결합 뮬신으로, 각막 상피의 항상성과 습윤성을 유지하는 데 중요한 역할을 한다. MUC4의 조절 불균형은 장벽 기능 장애 및 안구 표면 염증과 관련이 있다. 본 연구는 인간 각막 상피 세포(HCEs)에서 MUC4의 생리적 조절 역할을 조사하고 그 기저의 세포 내 메커니즘을 규명하는 것을 목표로 하였다. HCEs에서 MUC4는 렌티바이러스 기반의 shMUC4 의사바리온 전이를 통해 침묵시켰다. 세포 생존율은 CCK-8 시약을 통해 분석하였다. 세포 운동성은 실시간 배양 모니터링 시스템을 통해 모니터링하였다. 미토콘드리아 기능은 Seahorse 분석기로 분석하였다. 관련 단백질의 발현은 면역 블로팅을 통해 측정하였다. 주요 신호 경로에서 인산화 수준의 변화는 단백질 배열을 통해 측정하였다. HCEs에서 MUC4는 시간에 따라 증가하였다. 발현은 shMUC4 전이로 효과적으로 침묵화되었다. MUC4의 손실은 caspase-8 및 PARP1을 증가시키고 Bcl-2 및 Bcl-xL을 감소시켜 세포 생존율을 억제하였다. MUC4 손실은 FAK-Y397 및 paxillin-Y118의 인산화를 증가시켜 세포 운동성을 촉진하였다. 최대 호흡 및 여유 호흡 용량은 MUC4가 침묵된 HCEs에서 핵심 미토콘드리아 단백질(ATP8, MT-ND1, MT-ND3, MT-ND5, MT-CO2, 및 MT-CO3)의 발현 감소로 인해 낮았다. MUC4의 손실은 FAK를 활성화하고 HCEs에서 MAPK 관련 키나제의 활성화를 유도하였다. 이러한 결과는 지속적인 MUC4 생성이 세포 생존율을 유지하고 각막 상피 세포에서 이동을 방해함을 나타낸다.
Chen et al. (수요일)이 이 문제를 연구하였다.