Supresores genéticos del fenotipo de hipernodulación har1-1 de Lotus japonicus

Los mutantes har1 de Lotus japonicus responden a la inoculación con Mesorhizobium loti formando un número excesivo de nódulos debido a lesiones genéticas en el gen de la quinasa del receptor autorregulador HAR1. Para ampliar el repertorio de mutantes disponibles para la disección genética de la simbiosis de nódulos radiculares (RNS), se realizó una búsqueda de supresores del fenotipo de hipernodulación har1-1 de L. japonicus. De 150,000 plantas M2 analizadas, se aislaron 61 líneas de doble mutante estables de L. japonicus. En el contexto de la mutación har1-1, 26 líneas mutantes no pudieron formar RNS, mientras que las 35 líneas mutantes restantes tenían fenotipos simbióticos más sutiles, ya sea formando nódulos blancos ineficaces o mostrando una capacidad de nodulación reducida. Cuando se les desafió con Glomus intraradices, 18 de las 61 líneas supresoras no pudieron establecer una simbiosis con este hongo micorrízico arbuscular. Utilizando un enfoque combinado de mapeo genético, inducción de lesiones locales en genómica y secuenciación, se caracterizaron todas las líneas mutantes no nodulantes y se demostró que representan nuevos alelos de al menos nueve loci simbióticos independientes. La clase de mutantes con capacidad de nodulación reducida fue de particular interés porque algunos de ellos pueden especificar nuevas funciones en la planta que regulan el desarrollo de nódulos en L. japonicus. Para facilitar el mapeo de esta última clase de mutantes, se construyó una línea de introyección, en la que el alelo har1-1 fue introducido en un fondo polimórfico del ecotipo MG20 de L. japonicus.