テンプレート結合キナーゼによるRNAポリメラーゼIIのプロモータ依存的リン酸化。転写開始との関連

真核生物RNAポリメラーゼII（RNAP II）の最も大きなサブユニットは、DNAや転写因子の活性化領域と相互作用する可能性のあるセリンおよびスレオニンに富んだC末端ドメイン（CTD）を持っています。一つのモデルでは、タンパク質キナーゼがプロモーター関連CTDをリン酸化し、プロモーター結合型とRNA伸長型のRNAP IIの間の遷移を容易にすると提案されています。このモデルの予測を直接テストするために、固定化テンプレート転写系が使用されました。CTDを複数の部位でリン酸化するタンパク質キナーゼが検出されました。この活性は、複数回の洗浄後にも持続的な結合が確認されたことから、テンプレートにしっかりと結合していました。リン酸化はプロモーター配列依存的であり、初期化における以前に特徴付けられたATP依存的ステップと同じヌクレオチド基質特異性を示しました。この反応では、γ-32PATPと初期化rNTPが同時に存在することが効率的な放射線ラベルの追跡をするために必要であり、これは初期化とリン酸化が時間的に関連する反応であるという考えと一致しています。