硬骨鱼鲤鱼（Cyprinus carpio）补体成分 C3 差异形式的分子克隆与蛋白质分析：缺乏催化组氨酸变异体的存在

与哺乳动物不同，据报道部分硬骨鱼物种具有多种形式的补体成分 C3。为了探究硬骨鱼 C3 的结构和功能多样性，我们从单条鲤鱼（Cyprinus carpio）中分离出了八个编码 C3 的不同 cDNA 克隆。这八个序列被分为五种 C3 类型，分别命名为 C3-H1、C3-H2、C3-S、C3-Q1 和 C3-Q2，它们之间彼此共享 80-86 % 的氨基酸序列同一性。在对应催化组氨酸的位置上观察到了显著的氨基酸替换；该催化组氨酸在迄今分析的所有动物的 C3 中均保守，并赋予硫酯与靶细胞上的羟基共价结合或被快速水解的能力；而在 C3-H1 和 C3-H2 中保守的该组氨酸位置上，C3-S、C3-Q1 和 C3-Q2 分别具有丝氨酸、谷氨酰胺和谷氨酰胺残基。另一方面，从单条鲤鱼的血清中纯化出了五种不同的 C3 形式，命名为 C3-1 至 C3-5。N端测序和与 3Hglycine 的共价结合鉴定出 C3-1 为 C3-S 的翻译产物，而 C3-2 为 C3-H1 的翻译产物，C3-5 为 C3-H2 的翻译产物。C3-1 的溶血活性比 C3-2 高出三倍，而 C3-5 则无活性，这表明硫酯催化机制并非 C3 活性的必要决定因素，且缺乏催化组氨酸的 C3 在鲤鱼以及可能在其他硬骨鱼的补体系统中发挥着重要作用。