다중 약물 수송체 P-글리코프로틴의 기능 변경 변이체에서 약물 내성 및 약물 유도 구조 변화의 조정

MDR1 P-글리코프로틴(Pgp)은 암에서 임상적으로 중요한 형태의 다중 약물 내성에 책임이 있는 ATPase 배출 펌프로, 여러 친유성 약물에 대해 작용합니다. 인간 Pgp의 막횡단 도메인 3 근처에 위치한 G185V 변이는 에토포사이드 등 여러 약물을 운반하는 상대적 능력을 증가시키지만, 다른 기질의 운반은 감소시킵니다. G185V 치환이 있는 MDR1 cDNA는 Pgp 매개 에토포사이드 내성을 더욱 증가시킬 변이를 식별하기 위한 기능 기반 선택에서 사용되었습니다. 이 선택에서 G185V에 인접한 I186N 치환이 도출되었습니다. G185V, I186N 또는 두 가지 변이를 가진 Pgp는 NIH 3T3 세포에서 여러 약물에 대한 내성을 제공합니다. G185V의 차등 효과와는 대조적으로, I186N 변이는 모든 테스트된 약물에 대한 내성을 증가시켰으며, 에토포사이드 내성에 대한 G185V의 효과를 강화했습니다. 다양한 약물에 의해 유도된 Pgp의 구조 변화에 대한 변이의 효과는 구조 감지 항체 UIC2를 사용하여 조사되었습니다. UIC2 반응성을 증가시키는 약물에 의한 리간드 결합 분석은 Pgp에 대한 약물의 명백한 친화도를 반영하는 K(m) 값을 결정하고, 약물 결합 사이트의 명백한 수를 반영하는 Hill 수를 결정하는 데 사용되었습니다. 두 가지 변인은 약물에 의해 유도된 UIC2 면역 반응성의 증가, K(m) 값 및 개별 약물에 대한 Hill 수의 크기를 변경했습니다. 변이가 UIC2 반응성 변화의 크기에 미친 영향은 해당 약물에 대한 내성에 대한 변이의 효과와 상관관계가 없었습니다. 반대로, 야생형에 비해 약물 내성의 증가 또는 감소는 K(m) 또는 K(m) 및 Hill 수 모두의 증가 또는 감소와 함께 나타났습니다. 이 결과는 Pgp가 개별 약물을 운반하는 능력을 변경하는 변이가 Pgp의 명백한 친화도와 약물 결합 사이트의 수를 변화시킨다는 것을 시사합니다.