Mutantes de Deleção Viáveis do Vírus Símio 40: Isolamento Seletivo por Meio de uma Endonuclease de Restrição do Hemophilus parainfluenzae

A resistência do DNA do vírus símio 40 (SV40) à clivagem pela endonuclease de restrição Hemophilus parainfluenzae II (HpaII) tem sido usada como uma seleção positiva in vitro para mutantes que não possuem o local de clivagem da endonuclease HpaII do DNA do SV40 selvagem. Cada um dos 10 mutantes viáveis isolados por esse procedimento se multiplica significativamente mais lentamente do que o vírus selvagem e contém uma pequena deleção (80 a 190 pares de bases de tamanho) da região do genoma que inclui a sequência de reconhecimento da endonuclease HpaII. Esses mutantes bem definidos, tendo uma desvantagem seletiva para crescimento, não teriam sido facilmente obtidos por métodos convencionais usados para triagem de mutantes virais. Portanto, em certas circunstâncias, as endonucleases de restrição são reagentes eficazes para a seleção de novas classes de mutantes. Como essas pequenas deleções podem ser visualizadas em heteroduplexes, esses mutantes fornecem marcadores internos para mapeamento de outras alterações ou características do genoma do vírus símio 40.