ヒト血小板膜のヨウ素化

要旨 ヒト血小板の表面は、乳酸ペルオキシダーゼおよびグルコースオキシダーゼ-グルコース系によって生成された過酸化水素を利用して放射性ヨウ素で標識された。細胞内分画と電子顕微鏡オートラジオグラフィーにより、放射性標識が主に外部細胞膜に関連していることが明らかになった。溶解した膜タンパク質のナトリウムドデシル硫酸アクリルアミドゲル電気泳動により、トロンビンによって変化しない100,000分子量の膜糖タンパク質の強い標識が明らかになった。いくつかの小さな同位体標識のピークも検出された。完全な血小板に対する神経アミナーゼ処理は、主要な表面糖タンパク質の標識を顕著に減少させた。標識された表面糖タンパク質の部分精製は、リチウムジヨウ素サリチル酸塩を用いて単離した細胞膜から抽出することによって達成された。コンカナバリンAは、完全に洗浄された血小板を凝集させ、単離した膜糖タンパク質を沈殿させた。結合したコンカナバリンAを用いた親和性クロマトグラフィーが膜表面タンパク質の精製に利用された。