ラット脳からのカルシウム活性化リン脂質依存性プロテインキナーゼ。細胞内分布、精製、および特性。

ラット脳における研究が行われた。プロテインキナーゼの約3分の1は可溶性細胞質基質分画に回収され、別の3分の1は粗いミトコンドリア分画にあり、残りは核および微小小胞分画に存在した。粗いミトコンドリア分画のさらなる分析において、ほとんどの酵素がシナプソーム膜に関連付けられていることがわかった。細胞質基質プロテインキナーゼはDEAE-セルロースおよびセファデックスG-150カラムクロマトグラフィーによって約800倍に精製され、次に等電焦電泳動、青セファロースCL-GB、フェニルセファロースCG4Bカラムクロマトグラフィーが行われた。プロテインキナーゼの分子量は、スクロース密度勾配超遠心分離によって約77,000と推定された。酵素はナトリウムドデシル硫酸塩-ポリアクリルアミドゲル電気泳動でM、-82,000の単一バンドを示し、この酵素は1つのポリペプチド鎖から構成されていることを示している。酵素はカルモジュリンを含んでいなかった。膜に関連付けられたプロテインキナーゼはトリトンX-100で可溶化され、DEAE-セルロースおよびセファデックスG-150カラムクロマトグラフィーによって部分的に精製された。こうして得られた膜関連プロテインキナーゼは、物理的、動的、および触媒的特性において細胞質基質プロテインキナーゼと区別できなかった。両方の酵素はリン脂質およびマイクロモラル濃度のCa2+の存在下でジアシルグリセロールによって完全に活性化された。