L'activité de la kinase Src est essentielle pour la fonction des ostéoclastes

La délétion du gène c-src altère l'activité de résorption osseuse des ostéoclastes, provoquant une ostéopétrose. Bien qu'il ait été conclu que restaurer uniquement la fonction d'adaptateur Src sauve au moins en partie l'attachement cellulaire et les phénotypes squelettiques, la contribution de l'activité kinase Src reste controversée. Src forme un complexe avec Pyk2 et Cbl après la stimulation induite par l'adhésion de l'intégrine alpha(V)beta(3). Pour démontrer l'importance de l'association Pyk2-Src dans les ostéoclastes et distinguer les contributions des activités d'adaptateur et de kinase Src dans l'organisation du cytosquelette et la fonction des ostéoclastes, nous avons exprimé des mutants de Src et Pyk2 dans des ostéoclastes en utilisant des vecteurs d'adénovirus. L'élimination du site de liaison de Src sur Pyk2 (Pyk2(Y402F)) a considérablement inhibé la résorption osseuse par des cellules semblables aux ostéoclastes, tandis que Pyk2 incapable de kinase avait peu d'effet. Src incapable de kinase, contrairement à Pyk2 incapable de kinase, a considérablement inhibé l'activité de résorption osseuse des ostéoclastes de type sauvage et n'a pas réussi à restaurer de manière significative l'activité de résorption osseuse aux cellules semblables aux ostéoclastes Src(-/-). L'activation de la kinase Src par surexpression de Csk incapable de kinase n'a pas réussi à inverser l'effet inhibiteur de Pyk2(Y402F), suggérant que la résorption osseuse ostéoclastique nécessite à la fois l'activité de la kinase c-Src et le ciblage de la kinase Src par Pyk2. La phosphorylation catalysée par Src de Cbl sur Tyr-731 induirait l'activation et le recrutement de la phosphatidylinositol 3-kinase à la membrane cellulaire dans une voie de signalisation qui est critique pour la fonction des ostéoclastes. L'expression du mutant Cbl(Y731F) dans les ostéoclastes a considérablement réduit leur activité de résorption osseuse, suggérant que la phosphorylation de Cbl(Y731) et le recrutement et l'activation subséquents de la phosphatidylinositol 3-kinase pourraient être des événements de signalisation critiques en aval de Src dans les ostéoclastes.