Une protéine constitutive de l'undercoat de 220 kD : sa localisation spécifique aux sites d'adhésion cellulaire basés sur les cadherines.

Récemment, nous avons développé une procédure d'isolement pour les jonctions adhérentes intercellulaires (AJ ; jonctions basées sur les cadherines) à partir du foie de rat (Tsukita, Sh. et Sa. Tsukita. 1989. J. Cell Biol. 108:31-41). Dans cette étude, en utilisant les AJ isolées, nous avons obtenu deux mAbs spécifiques à la protéine constitutive de l'undercoat de 220 kD. L'immunofluorescence et la microscopie électronique d'immunomarquage avec ces mAbs ont montré que cette protéine de 220 kD était fortement concentrée à l'undercoat des AJ intercellulaires dans divers types de tissus et que cette protéine était située à proximité immédiate de la membrane plasmique dans l'undercoat des AJ. Dans les cellules dépourvues de jonctions adhérentes intercellulaires typiques, telles que les fibroblastes, la protéine de 220 kD a été montrée par immunofluorescence comme étant co-concentrée avec des molécules de cadherine aux sites d'adhésion cellulaire. Ces analyses de localisation semblaient indiquer l'association directe ou indirecte possible de la protéine de 220 kD avec les molécules de cadherine. De plus, il a été révélé que la protéine de 220 kD et l'alpha-spectrine étaient co-immunprécipitées avec les mAbs ci-dessus tant dans les AJ isolées que dans le cerveau. La molécule de protéine de 220 kD purifiée par affinité ressemblait à une particule sphérique, et son site de liaison sur la molécule de spectrine a été montré situé à environ 10-20 nm du point médian du tétramère de spectrine par microscopie électronique à ombre tournante à faible angle. En prenant tous ces résultats ensemble avec des comparaisons biochimiques et immunologiques, nous sommes convaincus de spéculer que la protéine de 220 kD est un nouveau membre de la famille des ankyrines. Cependant, la possibilité ne peut être exclue que la protéine de 220 kD soit un isoforme de la bêta-spectrine. Les rôles possibles de cette protéine de 220 kD dans l'association des molécules de cadherine avec les squelettes membranaires basés sur la spectrine aux sites d'adhésion cellulaire basés sur les cadherines sont discutés.