El núcleo potenciador de quimotripsina

Una secuencia conservada de 20 pares de bases (pb) presente en las regiones flanqueadoras 5' de los genes altamente expresados en el páncreas exocrino forma parte de los potenciadores de los genes amilasa 2A de rata, quimotripsina B y elastasa I. Se han detectado factores que interactúan con la secuencia de ADN conservada del gen quimotripsina B de rata in vitro en extractos de células acinares, pero no en otras tres líneas celulares probadas. Los experimentos de transfección sugieren que los factores de células acinares que reconocen esta secuencia de núcleo potenciador son activadores transcripcionales. Los multímeros de una secuencia de 28 pb localizada mediante protección de DNasa I son capaces de activar promotores heterólogos en células acinares. Los análisis de competencia de unión in vitro e interferencia de metilación indican interacciones proteína-ADN en dos sitios distintos separados por 10 pares de bases en el ADN. Esta interacción es idéntica en extractos de células acinares cultivadas y de tejido pancreático completo. La presencia de dos motivos de unión contiguos en la misma cara del ADN sugiere que dos (múltiples) factores cooperan en la regulación transcripcional de este gen. Denominamos a estos factores CACCTG pan-1 y TTTCCC pan-1. Un factor con la especificidad de unión del factor de transcripción tardío mayor del adenovirus (MLTF) reacciona cruzadamente con el factor CACCTG pan-1 in vitro. Sin embargo, la distribución de este factor en las diversas células no correlaciona con la actividad del elemento de núcleo potenciador in vivo. Además, la conversión de la secuencia de quimotripsina en un sitio de consenso de MLTF mediante tres mutaciones puntuales abolió la actividad potenciadora en células acinares. Por lo tanto, el factor similar a MLTF no puede sustituir funcionalmente al factor CACCTG pan-1 y puede actuar como un inhibidor de la función del potenciador de quimotripsina.