Edição do gene CCR5 de células T CD4+ em repouso por expressão transitória de ZFN a partir de lentivírus não integrador pseudotipado com envelope do HIV confere resistência ao HIV-1 em camundongos humanizados

A desativação do CCR5 por nucleases de dedo de zinco (ZFNs) é um método promissor para a terapia gênica do HIV-1. No entanto, a tradução clínica bem-sucedida dessa estratégia requer o desenvolvimento de um método seguro e eficaz para entrega nas células relevantes. Usamos lentivírus não integrador (NILV) para expressão transitória de ZFNs e pseudotipamos o vírus com o envelope do HIV para entrega direcionada às células T CD4+. Tanto as células T CD4+ primárias ativadas quanto em repouso transduzidas com NILV CCR5-ZFNs mostraram resistência à infecção por HIV-1 in vitro. Além disso, células T CD4+ em repouso transduzidas com NILV de indivíduos soronegativos para HIV-1 foram resistentes ao desafio por HIV-1 quando reconstituídas em camundongos NOD-scid IL2rγc nulos (NSG). Da mesma forma, a replicação viral endógena foi suprimida em camundongos NSG reconstituídos com células T CD4+ em repouso transduzidas por CCR5-ZFN de pacientes soropositivos para HIV-1 não tratados e tratados com ART. Juntas, as NILVs pseudotipadas com o envelope do HIV fornecem uma estratégia simples e clinicamente viável para a terapia gênica do HIV-1.